Авторы

Действие факторов замораживания на изменения внутриклеточного метаболизма при криоконсервации костного мозга человека

УДК 547.963

Действие факторов замораживания на изменения внутриклеточного метаболизма при криоконсервации костного мозга человека

Ващенко В. И., Чухловин А. Б., Петренко Г. И., Вильянинов В. Н., Багаутдинов Ш. М.

Аннотация
Проведены исследования донорского и аутологичного костного мозга, подвергнутого замораживанию с последующим оттаиванием. Регистрацию изоферментов лактатдегидрогеназы (ЛДГ) проводили на аппарате SUPER CELLO-5 (HOSPITEX, Швейцария). Показано, что в размороженных клетках меняется спектр изоферментов ЛДГ от М-форм в сторону Н-форм, свидетельствуя о быстром восстановлении клеточного метаболизма. Изменения изоферментного спектра ЛДГ, происходящие под действием сверхнизких температур, являются отражением внутриклеточной перестройки обменных процессов, как ключевого элемента адаптации клетки к понижению температуры. Полученные результаты свидетельствуют, что биохимические изменения согласуются со значительным уменьшением содержания АТФ в размороженных клетках костного мозга; при использовании ПЭО-400 в 1,5, а ПВП в 1,8 раза соответственно. Образование пировиноградной кислоты (элемента реакции гликолиза) значительно больше во взвеси размороженных клеток. Сохранность клеток костного мозга при криоконсервировании с криопротектором поливинилпирролидоном (ПВП) значительно выше, чем при использовании криофилактика ПЭО-400 (с ПВП около 85% и 57,2% для ПЭО-400). Выявлено, что степень структурных изменений сверхспиральной ДНК коррелировала (r = 0,92; p < 0,01) с изменением количества аденозинтрифосфата (АТФ) и пировиноградной кислоты (ПВК) во внеклеточной среде.

Ключевые слова: криоконсервирование, изоферменты лактатдегидрогеназы, сверхспиральная ДНК, биохимические изменения, клетки костного мозга, диметилацетамид, поливинилпирролидон, полиэтиленоксид 400

Список литературы

Багаутдинов Ш.M. Совершенствование методов долгосрочного хранения крови и костного мозга в замороженном состоянии в службе крови Вооруженных Сил.: Автореф.дис. ... д-ра биол.наук. – Л.,1998. 37 c.
Белоус А.М., Грищенко В.И. Криобиология. – Киев.: Наукова думка, 1994. 431 c.
Горбунов Л.В., Салина А.С. Оценка эффективности технологии криоконсервирования ооцитов и эмбрионов млекопитающих // Проблемы криобиологии. 2005. т. 15. № 3. С.255-262.
Михайлов В.Г. Консервация костного мозга. – М.: Медицина, 1979. 144 c.
Ващенко В.И., Никитин В.Ю., Вильянинов В.Н., Ващенко Т.Н., Титулова Т.Б. Особенности изменений сверхспиральной ДНК лимфоцитов и иммунитета человека при хронических перегрузках // Medline.ru. 2012. т. 13. С.185-194.
Ващенко В.И., Комар В.Е. Оценка конформационных изменений суперспиральной ДНК эукариотических клеток методом прямой флуориметрии “нуклеоидов”.I. Сравнительная информативность различных методов изучения нарушений структуры суперспиральной ДНК в тимоцитах и макрофагах // Цитология. 1986. т. 28. № 7. С. 750-754.
Ващенко В.И., Вильянинов В.Н. Развитие представлений о молекулярных механизмах действия криопротекторов при криоконсервировании костного мозга человека / В кн: Актуальные проблемы трансфузиологии. – СПб.: ВМедА, 2011. С. 24-25.
Грищенко В.И., Алексеевская Э.И. Криообновление, его роль в сохранении здоровья и долголетия. – Киев.: Наукова думка, 2009. 288 c.
Вильянинов В.Н. и др. Резервирование компонентов крови и гемопоэтических клеток с использованием низких температур: состояние и перспективы внедрения в интересах обеспечения пострадавших в чрезвычайных условиях. / В.Н. Вильянинов, С.П. Калеко, С.В. Сидоркевич, Ш.М. Багаутдинов, В.Н. Семелев, Г.И. Петренко, Н.Н. Попова // Вестник Международной академии холода. 2014. № 4. С. 48-53.
Ващенко В.И., Чечеткин А.В. Ващенко Т.Н., Петренко Г.И., Борисова Т.К. Особенности изменений сверхспиральной ДНК и активности топоизомераз костного мозга человека, пригодного для миелотрансплантации // Цитология, 2004. т. 46. № 10.- С.903.
Dietrfelbinger H.F., Kuhn D., Zafferani M. Removal breast cancer from bone marrow by in vitro purging with ether lipids and cryopreservation // Cancer Res. 1993. Vol. 53. No 16. P. 3744-3751.
Лучник А.Н. Изменение сверхспирализации ДНК при дифференцировке, старении и злокачественной трансформации // Онтогенез. 1983. т. 14, Nо 3. С. 227-237.